shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt／β－catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性的实验研究

目的:研究shRNA靶向沉默E盒结合锌指蛋白2(zincfingerE－boxbindinghomeobox,ZEB2)表达对肺癌细胞增殖活性的影响.方法:用 shRNA－ZEB2慢病毒和 shRNA阴性对照慢病毒感染肺癌细胞,Real timePCR和Westernblot检测沉默效果.MTT检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中激活型Caspase－3(CleavedCaspase－3)、β－连环蛋白(β－catenin)、C－myc蛋白水平.用Wnt／β－catenin信号通路抑制剂处理沉默ZEB2的肺癌细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡, Westernblot检测细胞中激活型Caspase－3、β－catenin、C－myc蛋白水平.结果:shRNA－ZEB2慢病毒可以明显沉默肺癌细胞中ZEB2的表达和转录,shRNA阴性对照慢病毒对肺癌细胞中ZEB2的表达没有影响.沉默ZEB2后的肺癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中激活型Caspase－3蛋白水平升高,β－catenin、C－myc蛋白水平降低.Wnt／β－catenin信号通路抑制剂下调沉默ZEB2的肺癌细胞株中Wnt／β－catenin信号通路的激活水平,同时可以降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,促进细胞中激活型Caspase－3的表达.结论:shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt／β－catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性.