shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt/β-catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性的实验研究
Journal of Modern Oncology(2019)
Abstract
目的:研究shRNA靶向沉默E盒结合锌指蛋白2(zincfingerE-boxbindinghomeobox,ZEB2)表达对肺癌细胞增殖活性的影响.方法:用 shRNA-ZEB2慢病毒和 shRNA阴性对照慢病毒感染肺癌细胞,Real timePCR和Westernblot检测沉默效果.MTT检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中激活型Caspase-3(CleavedCaspase-3)、β-连环蛋白(β-catenin)、C-myc蛋白水平.用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂处理沉默ZEB2的肺癌细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡, Westernblot检测细胞中激活型Caspase-3、β-catenin、C-myc蛋白水平.结果:shRNA-ZEB2慢病毒可以明显沉默肺癌细胞中ZEB2的表达和转录,shRNA阴性对照慢病毒对肺癌细胞中ZEB2的表达没有影响.沉默ZEB2后的肺癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中激活型Caspase-3蛋白水平升高,β-catenin、C-myc蛋白水平降低.Wnt/β-catenin信号通路抑制剂下调沉默ZEB2的肺癌细胞株中Wnt/β-catenin信号通路的激活水平,同时可以降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,促进细胞中激活型Caspase-3的表达.结论:shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt/β-catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性.
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Key words
lungcancer,ZEB2,Wnt/β-cateninsignalingpathway,proliferation,apoptosis
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