外源性S100A9通过TLR4诱导非小细胞肺癌细胞侵袭的实验研究

目的:探讨外源性钙结合蛋白S100A9通过Toll样受体4(TLR4)诱导对非小细胞肺癌细胞H1650侵袭及迁移的影响.方法:收集非小细胞肺癌组织及癌旁组织,实验组:培养基添加1 μg/ml S100A9培养的H1650细胞,对照组:不添加任何血清蛋白培养的H1650细胞.RT-PCR和Western blot分别检测S100A9mRNA和蛋白水平.RT-PCR检测转染后细胞中S100A9 mRNA的表达.采用划痕、黏附和平板克隆实验分别检测S100A9对H1650细胞生物学行为的影响,同时运用Western blot检测H1650细胞中TLR4蛋白,以观测其表达情况.结果:非小细胞肺癌组织中S100A9 mRNA和蛋白表达水平都高于癌旁组织,S100A9在非小细胞肺癌组织中过度表达(P＜0.01).S100A9小干扰RNA能够成功抑制非小细胞肺癌细胞中S100A9 mR-NA水平(P＜0.01).与对照组相比,实验组加入S100A9蛋白后1h,H1650细胞中TLR4的累积明显上调,S100A9起促进H1650细胞迁移(P＜0.05或P＜0.01)、基质黏附(P＜0.01)和平板克隆(P＜0.01)的作用.结论:TLR4在经过添加S100A9蛋白后NSCLC细胞株H1650细胞中的表达明显高于未添加S100A9蛋白的H1650细胞,有关实验中TLR4在肺癌中呈现为高表达,因此S100A9对肿瘤侵袭及迁移有着不可分割的联系,将成为肿瘤诊治的新靶点.