下调TPX2抑制喉癌细胞生长的体外实验研究

目的:研究TPX2对喉癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响.方法:Hep-2细胞中转染TPX2 siRNA、siRNA control记为TPX2 siRNA、siRNA-NC组,以不做转染的细胞为Con组.荧光定量PCR和Western blot分别测定细胞中TPX2 mRNA和蛋白水平,MTT测定各组细胞增殖,平板克隆实验测定各组细胞克隆形成能力,流式细胞术测定各组细胞周期情况,Western blot测定各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核增殖抗原(Ki-67)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白水平.结果:siRNA control中TPX2 mRNA和蛋白水平、细胞存活率、克隆形成数目、细胞周期以及细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白水平与Con相比均没有明显变化(P＞0.05).TPX2 siRNA细胞中TPX2mRNA和蛋白水平均明显低于Con(P ＜0.05).TPX2 siRNA细胞存活率、克隆形成数目均明显低于Con,细胞Go/G1期比例明显高于Con,细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白水平明显低于Con(P ＜0.05).结论:TPX2敲低可以降低喉癌细胞增殖、克隆形成能力,将细胞周期阻滞在G0/G1期,降低细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白表达.