抗胃癌干细胞单克隆抗体的筛选鉴定及功能研究
Journal of Modern Oncology(2018)
Abstract
目的:筛选鉴定靶向胃癌干细胞的功能单克隆抗体,为胃癌干细胞靶向治疗提供抗体候选药物.方法:以胃癌细胞系BGC-823为模型,采用流式细胞术分选CD44+细胞后检测其自我更新和致瘤能力.双色细胞免疫荧光检测单抗11H5和CD44在BGC-823细胞中的表达情况.流式细胞术分选11H5+细胞后检测其自我更新能力、细胞增殖和耐药能力.结果:流式细胞术分选CD44+细胞成球率明显高于CD44-细胞[(27.2±1.6)%vs(12.9±1.2)%](P<0.01),CD44+细胞的致瘤比CD44-细胞至少高100倍.细胞免疫荧光结果显单抗11H5识别的抗原能与CD44在BGC-823细胞上共定位.流式细胞术分选11H5+细胞体外成球率明显高于11H5-细胞[(21.4±2.0)%vs(6.2±1.0)%](P<0.01),耐药也明显高于11H5-细胞(IC 50值:0.986μmol/L vs 0.315μmol/L).抗体体外功能研究发现,单抗11H5能显著抑制BGC-823细胞成球,抑制率达到47.9%.单抗11H5能抑制其sphere细胞的增殖,抑制率为44.9%(P<0.05).经单抗11H5作用的耐药能力显著降低(IC 50值:0.52μg/ml vs 0.64μg/ml).结论:单克隆抗体11H5是一株抗胃癌干细胞的功能单抗,为胃癌干细胞靶向治疗的候选抗体药物.
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