IGF-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2中抑癌基因p16和p53表达的影响

目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)对人肝癌细胞HepG2中生物学表型变化及抑癌基因p16和p53表达的影响.方法:培养人肝癌细胞株HepG2,IGF-Ⅱ(25、 50、100 ng/ml)作用于不同时间点(24、48、72 h),观察各组细胞生物学表型变化.IGF-Ⅱ(50 ng/ml)作用于HepG2 48 h后,分别采用Real-time PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测人肝癌细胞中p16和p53的表达情况,并进行定量分析.结果:IGF-Ⅱ诱导HepG2细胞形态发生一定改变;IGF-Ⅱ可增加HepG2细胞存活率及细胞增殖,但差异无统计学意义(P>0.05);IGF-Ⅱ(50 ng/ml)对HepG2细胞的克隆形成有一定的促进作用,但差异无统计学意义(P>0.05).与对照组相比,IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16和p53 mRNA及蛋白表达量明显降低(P<0.05).此外,p16和p53阳性表达主要位于细胞核.对照组、IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16荧光表达量分别为(100.00±11.55)%、(68.33±6.01)%,p53荧光表达量分别为(100.00±17.32)%、(57.67±10.11)%.与对照组相比,IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16及p53荧光表达量明显减弱(P<0.05).结论:IGF-Ⅱ可通过诱导人肝癌细胞HepG2生物学表型的改变,下调抑癌基因p16和p53的mRNA及蛋白表达,继而发挥促进肝癌进展的作用.