Beclin1在MG132抗OVCAR3卵巢癌细胞中的变化及作用研究

目的:研究Beclin 1在MG132抗OVCAR3卵巢癌细胞中的变化及作用.方法:OVCAR3细胞经不同浓度MG132处理24h后,MTT法检测细胞存活率,Western blot法检测自噬相关Beclin 1蛋白的变化.采用细胞转染技术过表达卵巢癌细胞中Beclin 1,MG132处理24h后,MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33258进行核染色观察染色质浓缩和核碎片等凋亡特征性形态学改变.采用shRNA技术下调OVCAR3细胞的Beclin 1表达,MG132处理细胞,AO染色观察酸性自噬泡的形成.结果:与空白对照组比较,1、2、5和10 μmol/L浓度的MG132作用24h均能明显抑制 OVCAR3细胞的生长(均P＜0.05),5μmol/L浓度接近半抑制率;而且5μmol/L和10μmol/L浓度的MG132作用24h能显著诱导OVCAR3细胞的Beclin 1蛋白水平下降(P=0.001).与空质粒转染组对比,过表达Beclin 1的卵巢癌细胞在MG132处理后核的凋亡明显增加;细胞存活率明显降低,(P=0.00089).下调卵巢癌细胞中Beclin 1表达后,MG132诱导的酸性囊泡蓄积无改变.结论:MG132使OVCAR3细胞中Beclin 1降低,Beclin 1具有增强MG132抗OVCAR3的作用,但该作用与自噬无关.