SEPT6对膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡的影响及其机制的研究

目的 探讨干扰SEPT6基因的表达对膀胱癌EJ细胞株增殖、凋亡的影响以及潜在的机制.方法 用特异性SEPT6基因小干扰RNA序列转染膀胱癌EJ细胞作为SEPT6沉默组,以转染非特异性序列作为对照组.采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测转染效率,流式细胞仪检测转染后细胞的周期变化;同时采用Hoechst 33342细胞染色法检测转染后EJ细胞的凋亡;Western blotting检测相关信号通路蛋白的表达变化.结果 QPCR检测显示,SEPT6沉默组SEPT6 mRNA的表达水平为(23.4±2.3)％,显著低于对照组的(100.0±2.2)％,差异有统计学意义(P＜0.05).转染72 h后,对照组和SEPT6沉默组细胞的吸光值(A)分别为3.7+0.4、2.3±0.1,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测显示,转染48 h后,对照组和SEPT6沉默组G0/C1期细胞比例分别为(43.3±4.2)％和(64.5±2.8)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Hoechst 33342细胞凋亡荧光染色结果 显示,对照组和SEPT6沉默组的细胞凋亡比例分别为(8.2±1.4)％、(24.2±3.2)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting检测显示,与对照组比较,SEPT6沉默组PTEN蛋白表达增加、Akt蛋白磷酸化降低.结论 干扰SEPT6基因的表达能显著抑制膀胱癌EJ细胞的增殖,导致其凋亡增加.其机制可能与PTEN/Akt信号通路的激活有关.