米哚妥林衍生物L156对人红白血病HEL细胞增殖和凋亡的作用及其机制研究

目的 研究米哚妥林衍生物L156对人红白血病HEL细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 采用MTT法检测L156对人红白血病HEL细胞增殖的影响,绘制细胞生长曲线并计算IC50;流式细胞仪检测L156不同浓度和作用时间对HEL细胞分化、周期和凋亡的影响;Hoechst 33258染色检测L156对细胞核形态的影响;Western blotting检测L156对HEL细胞中凋亡和周期相关蛋白的影响.结果 L156可显著抑制人红白血病HEL细胞的增殖,IC50为(0.073±0.0034)μM;L156可诱导HEL细胞发生早期凋亡和晚期凋亡,并呈时间和浓度依赖性(P<0.05);L156可阻滞HEL细胞周期,使G2/M期细胞比例显著增加;L156可明显提高细胞巨核分化标志物CD41a/CD61和细胞红系分化物CD71/CD235a的表达水平,并呈浓度依赖性(P<0.05);L156可抑制细胞信号转录因子STAT3的磷酸化,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和周期蛋白cyclinB1的表达,上调凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3的表达,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 L156可抑制STAT3的磷酸化,从而通过下调Bcl-2的表达和上调Cleaved-Caspase-3的表达来促进HEL细胞凋亡,并通过下调周期蛋白cyclinB1的表达将细胞周期阻滞于G2/M期,从而抑制细胞增殖,但其靶点是否为STAT3仍需进一步研究确定.L156还可诱导HEL细胞向巨核和红系两个方向分化,使其具有向良性转变的可能,可作为治疗红白血病的候选药物.