NOTCH1对T-ALL抑癌基因ID4的负调控作用

目的 研究DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding 4,ID4)在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)中的表达水平,探讨NOTCHl与ID4的相关性及其调控机制.方法 通过Oncomine和Pieters R数据库分析T-ALL患者与正常捐献者中ID4的表达差异及T-ALL患者中NOTCH1与ID4的相关性,用qRT-PCR和Western blot检测阻断NOTCH1或激活NOTCH1后ID4的表达变化进行验证.用生物信息学的方法特异预测出microRNA-342(miR-342)靶向ID4,通过双荧光素酶报告体系进行验证.过表达或沉默miR-342后,qRT-PCR和Western blot检测ID4的表达变化阻断NOTCH1或激活NOTCH1,qRT-PCR检测miR-342的表达变化 结果 ID4在T-ALL患者中的表达较正常组显著下调(P＜0.01);ID4受NOTCH1负调控(P＜0.05);双荧光素酶报告系统验证预测结果正确;过表达miR-342后,ID4的表达受到显著抑制(P＜0.05),沉默miR-342后,ID4的表达明显上调(P＜0.05);NOTCH1信号的阻断能够抑制miR-342的表达,NOTCH1信号的激活能够上调miR-342的表达.结论 NOTCH1通过激活miR-342对ID4的负调控作用从而下调抑癌基因ID4的表达,促进T-ALL的发生.