CD59 RNAi逆转录病毒载体转染卵巢癌细胞株A2780的构建

wf(2016)

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摘要
目的:获得携带针对人CD59基因 pSUPER retro RNAi 逆转录病毒载体的卵巢癌细胞株A2780。方法设计能转录产生靶向CD59小发夹RNA ( shRNA)转染逆转录病毒载体pSUPER retro neo+gfp质粒,构建pSUPER-siCD59重组质粒,将重组质粒导入卵巢癌细胞株A2780内。鉴定转染后细胞株能形成稳定的扩增。结果重组质粒经PCR凝胶电泳、核苷酸测序证实与设计序列一致;重组质粒转染卵巢癌细胞株A2780,可稳定表达绿色荧光蛋白。结论携带针对人CD59基因 pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体的卵巢癌细胞株A2780的建立为深入进行肿瘤细胞研究奠定了基础。
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关键词
siRNA,CD59,Retroviral vector,Ovarian cancer cell A2780
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