RNAi抑制iASPP基因表达对大肠癌细胞凋亡的影响及机制
Journal of Chinese Oncology(2019)
Abstract
[目的]探讨RNAi抑制iASPP基因表达对大肠癌细胞凋亡的影响.[方法]参照脂质体LipofectamineTM2000转染说明转染iASPP的siRNA(iASPP-siRNA组)进入人大肠癌LoVo细胞株,并设置阴性对照组(转染无义的siRNA序列)和空白对照组(仅加入脂质体),Western bloting检测转染48h的3组细胞中iASPP的蛋白表达;CCK8法于转染的24h、48h、72h检测细胞活力;流式细胞术检测转染48h的细胞凋亡率;Western blotting检测Ki-67、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase3)、STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)的蛋白表达.[结果]iASPP-siRNA组(0.108±0.013) LoVo细胞株iASPP的蛋白表达显著低于空白对照组(0.389±0.036) (P<0.05);iASPP-siRNA组细胞在24h (0.267±0.034)、48h(0.495±0.067)和72h(0.682±0.068)的活力细胞均显著低于空白对照组(0.385±0.042、0.688±0.074、0.977±0.097)(P<0.05),在48h的细胞凋亡率(11.18%±0.78%)显著高于空白对照组(2.13%±0.45%)(P<0.05).Ki-67(0.126±0.018)和p-STAT3(0.110±0.012)的蛋白表达水平显著低于空白对照组(0.365±0.045、0.169±0.018),Caspase3(0.197±0.020)表达水平高于空白对照组(0.086±0.009)(P<0.05),3组间STAT3蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).[结论]通过RNAi抑制iASPP基因表达可降低大肠癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,机制可能是下调STAT3信号,对细胞增殖的影响是下调Ki-67表达,凋亡的影响是上调Caspase3表达.
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