MiR-374a通过PTEN/AKT信号通路调节乳腺癌细胞的增殖和凋亡

[目的]探讨miR-374a在乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用,并进一步探讨其机制.[方法]采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测人乳腺癌细胞MCF-7及正常人乳腺细胞Hs 578Bst的miR-374a及PTEN mRNA转录水平,Western blot法测定MCF-7、Hs 578Bst组细胞及对照、miR-374a抑制剂组细胞的PTEN、p-AKT蛋白表达变化,用CCK-8法及Tunel法分别观察对照组和miR-374a抑制剂组细胞的增殖和凋亡,并用Western blot法检测两组细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达.[结果]与人正常乳腺Hs 578Bst细胞相比,乳腺癌MCF-7细胞的miR-374a表达水平显著性增高(P＜0.001),PTEN mRNA及蛋白的表达水平显著性降低(P＜0.001),而p-AKT蛋白表达水平明显升高(P＜0.001).miR-374a抑制剂可抑制乳腺癌细胞的增殖(P＜0.001),并促进其凋亡的发生(P＜0.001),降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平(P＜0.001)的同时活化凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9 (P＜0.001).miR-374a通过靶点PTEN影响AKT通路,miR-374a组细胞PTEN mRNA表达水平显著性降低(P＜0.001),而miR-374a抑制剂处理后,PTEN蛋白水平显著性升高(P＜0.001),p-AKT表达降低(P＜0.001).[结论]miR-374a在乳腺癌细胞高表达,并通过调节PTEN/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖,促进凋亡的发生.miR-374a/PTEN/AKT信号通路有望成为乳腺癌的新治疗靶点.