过表达calbindin-d28k在卡铂诱导子宫内膜癌细胞凋亡中的作用及机制

[目的]研究过表达钙结合蛋白calbindin-d28k对卡铂诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.[方法]构建calbindin-d28k基因真核过表达calbindin-d28k质粒,稳定转染子宫内膜癌Ishikawa细胞;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹方法检测细胞中靶基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测不同浓度卡铂作用下子宫内膜癌Ishikawa细胞的存活率Hoechst 33258染色法观察卡铂诱导的子宫内膜癌Ishikawa细胞胞核变化.[结果]卡铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的最佳作用浓度为100μg/ml,可显著性上调细胞活性Caspase-3蛋白的表达(P＜0.05);稳定转染组Ishikawa细胞calbindin-d28k mRNA水平上调约10倍,蛋白水平升高约1.6倍(P＜0.05);过表达calbindin-d28k后,卡铂诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡作用减弱,活性Caspase-3蛋白的表达水平下调约7倍(P＜0.05).[结论]过表达calbindin-d28k蛋白可抑制卡铂诱导的子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡作用,并与通过下调Caspase-3有关.