miRNA通过Mcl-1基因调控HBV阳性肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性

目的:探讨干预HBV阳性肝癌细胞相关miRNAs对肝癌细胞索拉菲尼敏感性的影响.方法:qPCR检测HepG2.2.15 (HBV阳性)和HepG2.vc (HBV阴性)肝癌细胞中miR-29、miR-101和miR-193b的表达,以HepG2.2.15细胞中低表达的miRNA合成相应的miRNA mimics,并将目标miRNA mimics分别转染至HepG2.2.15和HepG2.vc细胞;qPCR检测两种细胞中目标miRNA表达,Western blotting检测目标miRNA mimics转染前后Mcl-1蛋白表达.同时分别向转染和非转染的HepG2.2.15和HepG2.vc细胞中分别加入(1×10-9)～(1×10-3)mol/L的索拉菲尼,72 h后测定索加菲尼对细胞作用的IC50值和细胞凋亡率.结果:与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-193b的表达显著降低(P＜0.05);与miR-193b mimics转染前比较,HepG2.2.15和HepG2.vc细胞中miR-193b的表达均有显著升高(P＜0.05).与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中Mcl-1蛋白表达显著增高(P＜0.05);miR-193b mimics转染后,HepG2.2.15和HepG2.vc细胞中Mcl-l蛋白表达较两者转染前均有显著降低(P＜0.05);miR-193b mimics转染后,索拉菲尼可显著增加两组细胞的凋亡率(P＜0.01),同时其对两组细胞作用的IC50值显著降低[HepG2.2.15细胞:(0.215±0.028) vs (0.391±0.025) mol/L,HepG2.Vc细胞:(0.315±0.027) vs (0.654±0.019) mol/L;均P＜0.01].结论:HBV相关肝癌细胞中miR-193b的低表达可能是癌细胞对索拉菲尼敏感性降低的原因,Mcl-1可能为miR-193b的靶点,miR-193b mimics与索拉菲尼具有显著协同作用.