miR-149-3p通过靶向FOXP3抑制宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为

目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制.方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimic-scramble为miR-149 mimic的阴性对照随机序列.荧光素酶实验验证miR-149-3p与FOXP3的靶向结合关系.实时定量PCR(qRT-PCR)检测HeLa细胞中miR-149-3p表达及FOXP3的mRNA水平,Western blotting检测FOXP3的蛋白水平.CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移.结果:荧光素酶实验显示miR-149-3p可靶向结合FOXP3.与未转染组相比miR-149mimic组miR-149-3p表达升高、FOXP3 mRNA水平下降(P＜0.01),而且miR-149mimic组FOXP3蛋白水平低于未转染组(P＜0.01)、pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平高于未转染组(P＜0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平降低(P＜0.01).miR-149 mimic组细HeLa胞增殖倍数低于未转染组(P＜0.01),pc-FOXP3组细胞增殖倍数高于未转染组(P＜0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞增殖倍数下降(P＜0.01);miR-149mimic组HeLa细胞凋亡率高于未转染组(P＜0.01),pc-FOXP3组细胞凋亡率低于未转染组(P＜0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞凋亡率上升(P＜0.01);miR-149 mimic组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于未转染组(P＜0.01),pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率高于未转染组(P＜0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降(P＜0.01).结论:miR-149-3p通过靶向FOXP3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,同时促进细胞凋亡.