miR-204过表达抑制成视网膜细胞瘤细胞的增殖与侵袭及其可能的机制

目的:观察miR-204对成视网膜细胞瘤(retinoblastoma,RB)细胞增殖与侵袭的影响,探讨其可能的调控机制.方法:应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RB细胞系Y79、SO-RB50、HXO-Rb44和人正常视网膜色素上皮细胞系hTERTRPE-1中miR-204的表达水平.将Y79细胞系分成阴性对照组和miR-204组,分别应用脂质体转染法转染NC-mimics和miR-204 mimics,CCK-8增殖实验检测miR-204表达对Y79细胞增殖的影响,细胞划痕实验和Transwell小室法检测miR-204对Y79细胞迁移和侵袭的影响,应用生物学信息法预测miR-204的可能作用靶基因,应用qRT-PCR和Western blotting检测miR-204对靶基因高迁移率族蛋白A2(high mobility group AT-hook 2,HMGA2) mRNA和蛋白表达的影响.结果:miR-204在RB细胞系Y79、SO-RB50、HXO-Rb44中的表达较人正常视网膜色素上皮细胞系hTERTRPE-1明显降低(P＜0.01).转染miR-204 mimics后,Y79细胞中miR-204表达明显升高(P＜0.01)、细胞增殖能力明显下降(P＜0.01)、迁移及侵袭能力明显降低(P＜0.01),miR-204的靶基因HM-GA2 mRNA和蛋白的表达明显下降(P＜0.01).结论:miR-204在RB细胞系中低表达,过表达miR-204能够抑制RB细胞的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与下调HMGA2基因的表达有关.