脐带血和乳腺癌患者外周血来源CIK细胞PD-1表达及对MCF-7细胞杀伤

目的:探讨脐带血和乳腺癌患者外周静脉血来源的CIK细胞程序性死亡分子-1(programmed cell death-1,PD-1)的表达及其对乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用.方法:采集2015年6月至2015年12月在解放军第105医院住院的健康产妇脐带血和乳腺癌患者外周静脉血各5例,分离PBMC,体外培养、扩增CIK细胞.流式细胞术检测不同时间节点两种来源的CIK细胞PD-1表达情况,分别取培养第7、14、21、28天的CIK细胞与MCF-7细胞共培养,细胞计数(CCK-8)法测定CIK细胞对MCF-7细胞的杀伤率,吖啶橙·溴化乙啶双染(AOEB)法观察共培养后CIK细胞凋亡变化,流式细胞术检测CIK细胞凋亡率.结果:随着体外培养时间的延长,脐带血和乳腺癌患者静脉血来源的CIK细胞PD-1表达率均逐渐上升,第14天时脐带血组CIK细胞PD-1表达率低于乳腺癌组[(38.42±4.76)％ vs (50.54±3.50)％,P＜0.05],至第21天后两组PD-1表达率均升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).培养第7、14、21、28天两组CIK细胞对MCF-7细胞的杀伤率分别为(18.54±3.54)％和(21.74±4.27)％、(71.86±16.86)％和(58.78±24.25)％、(44.32±26.87)％和(43.96±26.04)％、(43.24±24.27)％和(40.28±23.69)％,以培养第14天的脐带血来源的CIK细胞的杀伤活性最强(P＜0.05).分析发现,两种来源的CIK细胞PD-1表达水平与CIK细胞的凋亡率呈正相关(r=0.971,r =0.900,均P＜0.01),与杀伤率呈负相关(r=-0.865,r=-0.885,均P＜0.01).结论:活化的CIK细胞表面高表达PD-1,脐带血较乳腺癌患者静脉血来源的CIK细胞表面PD-1水平低;培养第14天的CIK细胞凋亡率均较低,其杀伤能力更强.