高转移潜能肝癌HCCLM3细胞中侧群细胞的分离及其干细胞特性鉴定

目的:检测高转移潜能肝癌HCCLM3细胞株中侧群(side population,SP)细胞比例,分选SP细胞并探讨其生物学特性.方法:4种肝癌细胞株的转移潜能大小依次为HCCLM3＞MHCC97H＞ MHCC97L＞ Huh7,分别予以荧光染料Ho-echst33342染色,以加入维拉帕米的拮抗组为对照,流式细胞术检测SP细胞比例;从HCCLM3细胞中分选SP细胞和主群(main population,MP)细胞,采用悬浮球培养、Transwell侵袭实验及裸鼠成瘤实验判断HCCLM3 SP细胞是否具备肿瘤干细胞生物学特性;RT-PCR检测SP及MP细胞中干细胞相关基因的表达.结果:HCCLM3细胞中SP细胞比例为(16.9±1.8)％,显著多于MHCC97H、MHCC97L、Huh7中SP细胞比例[(8.4±0.7)％、(4.6±0.5)％、(1.0±0.2)％,均P＜0.05].HCCLM3细胞中,SP细胞悬浮球形成明显高于MP细胞[(25.3±5.1)％vs(11.2±2.6)％,P＜0.05],SP细胞的侵袭能力显著高于MP细胞(P＜0.05),SP细胞的裸鼠皮下成瘤能力也明显高于MP细胞.HCCLM3细胞的SP细胞中干细胞相关基因ABCG2、CD13、CD44、Nanog、Sox2及Klf4 mRNA平均表达水平分别是MP细胞的5.64、2.26、2.10、3.78、2.37、2.92倍(均P＜0.05).结论:肝癌HCCLM3细胞的SP细胞中富集了肝癌干细胞,这可能与其较高的转移潜能有关.