PersonGenTM技术和CIK细胞培养方法对T细胞扩增与活化效果的比较

目的:探讨基于第一/第二刺激信号原理联合IL-15的的T淋巴细胞扩增技术(PersonGenTM)和细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞培养扩增方案对T细胞扩增和活化的效果.方法:分离8名健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用CIK细胞扩增技术(CIK组)、PersonGenTM扩增技术(PersonGenTM组)及两种技术的联合应用(C+P组)刺激PBMC增殖,应用细胞计数法和流式细胞术比较T细胞的扩增效率及T细胞亚群比例,并以人白血病K562细胞及骨髓瘤RPMI 8226细胞为靶细胞检测扩增后T细胞的杀伤活性.结果:经过3周培养后,CIK、PersonGenTM和C+P3组T细胞扩增倍数分别为(254 ±56)、(863 ±218)和(793.3±395)倍.其中CD3+细胞所占比例分别为(51.61 ±14.95)％、(99.21±0.79)％和(96.14 ±5.16)％;CD3+ CD4+在CIK组细胞扩增了近5倍,C+P组与PersonGenTM组均扩增近160倍;CD3+ CD8+细胞在CIK组扩增了近500倍,C+P组和PersonGenTM组扩增达千倍;CD3+ CD56+ NKT细胞在CIK组扩增700多倍,其他两组达千倍.杀伤实验结果显示,当E∶T为5∶1时,3组细胞对K562杀伤率为(45.53±19.16)％、(36.53±10.6)％和(53.17±5.83)％,对RPMI 8226杀伤率为(41.23±12.5)％、(38.83±4.3)％和(45.73±7.48)％.结论:Person GenTM扩增技术获得的T细胞数量多、纯度高,其中CD3+ CD8+和CD3+ CD56+ NKT细胞比例较高,其对K562和RPMI 8226肿瘤细胞的杀伤效果相似于CIK细胞扩增方案获得的T细胞.