hSulf-1过表达提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性

目的:探讨人硫酸酯酶-1(human sulfatase 1,hSulf-1)基因过表达是否提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性.方法:采用不同浓度AZD2281处理细胞,并筛选AZD2281处理的最佳浓度.将携hSulf-1基因的重组腺病毒Ad5-hSulf1感染MCF-7细胞,以Ad-hSulf1和AZD2281单独或联合处理MCF-7细胞,以Ad5-EGFP处理为对照.采用流式细胞术检测细胞周期,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin depend-ent kinase 4,CDK4)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达,Transwell法、MTT法分别检测细胞的迁移及增殖.结果:AZD2281浓度为7μmol/L时对MCF-7细胞的抑制作用趋于峰值,用于后续实验.Ad5-hSulf1+ AZD2281联合处理与AZD2281单独处理相比,MCF-7细胞的G2/M期细胞比例明显增多[(22.15±0.17)％vs(17.44 ±0.57)％,P＜0.01],细胞克隆形成率[(21.43±1.52)％ vs(49.43±1.44)％,P＜0.01]及细胞周期蛋白CDK4的表达[(0.67 ±0.02)vs(0.72±0.02),P＜0.05]、AKT的磷酸化水平[(0.17 ±0.003)vs(0.42 ±0.02),P＜0.01]均明显降低,同时细胞的增殖率和迁移能力也有明显下降[(57.69±4.83)％ vs(79.35±5.44)％;(10.33±1.53)个vs(50.67 ±2.31)个,均P＜0.01].结论:hSulf-1过表达可明显提高乳腺癌细胞MCF-7对AZD2281的化疗敏感性,阻滞细胞周期于G2/M期,并更明显地抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,这一效应可能是通过调节细胞周期蛋白CDK4及AKT通路产生的.