重组人粒细胞集落刺激因子增加急性髓性白血病细胞对三氧化二砷的敏感性及其机制探讨

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocytecolony-stimulating factor,rhG-CSF)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)(分子式As2O3)对急性髓性白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:AML细胞HL-60和THP-1用100 ng/mL rhG-CSF预处理后,再用不同浓度的As2O3处理;CCK-8法检测细胞增殖并计算相对增殖抑制率,FCM法检测细胞的凋亡率及细胞周期.实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法分别检测HL-60和THP-1细胞及急性早幼粒细胞白血病NB4细胞中水通道蛋白9 (aquaporin 9,AQP9) mRNA及蛋白的表达水平,以及rhG-CSF作用后HL-60和THP-1细胞中AQP9 mRNA及蛋白表达水平的变化.结果:单药rhG-CSF可以促进HL-60和THP-1细胞的增殖(P值均＜0.01);与不同浓度的As2O3单药组相比,rhG-CSF预处理后,与2 μmol/L As2O3联用有抑制HL-60和THP-1细胞增殖的作用(P值均＜0.05).rhG-CSF联合不同浓度As2O3组细胞的凋亡率明显提高(P值均＜0.05).As2O3会导致白血病细胞发生G0/G1期阻滞(P值均＜0.05);rhG-CSF可以使HL-60和THP-1细胞发生S期阻滞(P值均＜0.01),与As2O3联合作用时该效应更明显(P值均＜ 0.05).HL-60和THP-1细胞中AQP9 mRNA及蛋白的表达水平明显低于其在NB4细胞中的表达水平(P值均＜0.01);与对照组相比,rhG-CSF (100 ng/mL)能上调HL-60和THP-1细胞中AQP9 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05).结论:rhG-CSF可以增加非M3型AML细胞对As2O3的敏感性,其机制可能与上调细胞中AQP9表达水平有关.