环状RNA RNF13通过下调miR-196b-5p的表达促进结直肠癌细胞的增殖

目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中环状RNA (circular RNA,circRNA)RNF13 (circRNF13)的表达水平及临床意义,并探索circRNF13调控微RNA (microRNA,miRNA,miR)-196b-5p表达对CRC细胞增殖的影响.方法:采用circRNA芯片从6对CRC患者癌和癌旁组织中筛选出差异表达的circRNA;实时荧光定量PCR法检测80例CRC患者癌和癌旁组织及CRC细胞和人结肠黏膜上皮细胞FHC中circRNF13和miR-196b-5p的表达水平,并分析其与患者临床病理特征的关系.构建circRNF13过表达载体(circRNF13-OE),以空载体pcDNA(+)作为阴性对照(negative control,NC),分别转染HCT116和HT29细胞;CCK-8法检测细胞的增殖能力,实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-196b-5p的表达水平.HCT116和HT29细胞分别转染NC、circRNF13-OE、miR-196b-5p-抑制子(miR-196b-5p-inhibitor)、circRNF13-OE+miR-196b-5p-模拟物(miR-196b-5p-mimics),再行CCK-8法检测细胞的增殖能力.结果:circRNA芯片检测结果显示,circRNF13在CRC组织中的表达水平明显低于癌旁组织.实时荧光定量PCR验证结果显示,CRC组织中circRNF13表达水平显著低于癌旁组织(P＜0.001).HCT116、HT29、SW620和SW480细胞中circRNF13的表达水平均明显低于FHC细胞(P值均＜0.001).circRNF13过表达后,HCT116和HT29细胞增殖能力受到明显抑制(P值均＜ 0.05).CRC组织以及HCT116、HT29、SW620和SW480细胞中miR-196b-5p的表达水平较癌旁组织和FHC细胞明显升高(P值均＜0.01).CRC组织中circRNF13的表达水平与miR-196b-5p的表达水平呈负相关(P=0.000 1,r=-0.484).CRC患者癌组织中circRNF13和miR-196b-5p的表达水平与淋巴结转移、分化程度及TNM分期有关(P值均＜ 0.05).与circRNF13-OE组细胞相比,circRNF13-OE+miR-196b-5p-mimics组HCT116和HT29细胞的增殖能力均明显提高(P值均＜ 0.05).结论:CRC组织中circRNF13的表达水平下调,上调circRNF13的表达水平可抑制CRC细胞增殖,circRNF13通过下调miR-196b-5p表达促进CRC细胞的增殖.