沉默PXDN基因表达抑制卵巢癌SKOV3和OV15细胞的增殖和迁移及可能的作用机制

目的:探究过氧化物酶(peroxidase,PXDN)在卵巢癌中的功能和潜在的作用机制.方法:通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和Kaplan-Meier Plotter数据库分析PXDN在卵巢癌组织中的表达情况,以及与患者预后的关系.采用免疫组织化学法检测79例浆液性卵巢癌及137例良性卵巢囊肿组织中PXDN的表达情况,并分析与临床病理参数的相关性.使用特异性针对PXDN基因的siRNA沉默卵巢癌SKOV3和OV15细胞中PXDN蛋白的表达,用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell小室法和划痕愈合实验检测沉默PXDN基因表达对SKOV3和OV15细胞增殖和迁移功能的影响.采用特异性针对PXDN基因的shRNA沉默SKOV3细胞中PXDN蛋白的表达,再用转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β) (10 ng/mL)处理PXDN沉默后的SKOV3细胞;通过蛋白质印迹法检测上皮-间质转化相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达水平以及TGF-β3信号通路中Snail1、Smad2、Smad3、Smad4以及磷酸化Smad2和Smad3蛋白的表达水平.结果:相较良性卵巢组织,卵巢癌组织中PXDN表达显著增高(P＜0.001),并且PXDN高表达与卵巢癌预后不良相关(P＜0.001).沉默PXDN表达可抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移(P值均＜ 0.001).沉默PXDN表达后再用TGF-β处理SKOV3细胞,E-cadherin蛋白的表达水平明显上调,而FN蛋白的表达水平下调(P值均＜0.01),Smad2和Smad3的表达水平没有明显变化,Snail1、Smad4以及磷酸化Smad2和Smad3蛋白的表达水平均明显下调(P值均＜ 0.01),沉默PXDN表达可逆转TGF-β诱导的上皮-间质转化的发生.结论:PXDN可能通过TGF-β/Smad通路调控卵巢癌上皮-间质转化的发生.