miR-140-5p调控Nrf2影响结肠癌细胞5-FU耐药性

目的 观察miR-140-5p对结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU及其亲本细胞株SW480 5-FU敏感性的影响及其与核因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)的关系,探讨miR-140-5p调控结肠癌细胞5-FU耐药的可能机制.方法 用结肠癌细胞株SW480构建结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU,qRT-PCR法检测两株细胞中miR-140-5p的表达,CCK-8法和细胞集落形成实验评估miR-140-5p对两株细胞5-FU敏感性的影响;采用qRT-PCR法、Western blot法双荧光素酶报告基因验证miR-140-5p与Nrf2的关系,CCK-8法、细胞集落形成实验探讨miR-140-5p调控结肠癌细胞5-FU敏感性与Nrf2的关系.结果 成功构建结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU,其miR-140-5p表达水平显著低于亲本细胞株SW480(P＜0.05);CCK-8法、细胞集落形成实验结果显示,miR-140-5p可增强SW480/5-FU细胞对5-FU的敏感性,而降低SW480对5-FU的耐药性;qRT-PCR法、Westren blot法、双荧光素酶报告基因实验共同证实miR-140-5p可结合并抑制Nrf2的表达;CCK-8、细胞集落形成实验表明,Nrf2过表达能逆转miR-140-5p对结肠癌耐药细胞SW480/5-FU的5-FU敏感性调控结果.结论 miR-140-5p可能通过结合并抑制Nrf2表达,增加结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU对5-FU的敏感性.