TSP-1基因对骨肉瘤血管生成的影响及其作用机制

目的 本研究旨在探讨TSP-1基因对人骨肉瘤血管生成的影响及其作用机制.方法 通过构建pBPLV-shRNA-TSP-1干扰载体和pBPLV-TSP-1表达载体,对MG-63细胞进行转染,利用CCK8检测细胞活力,并测定其侵袭能力,然后通过免疫荧光检测细胞内CD36等表达量,qRT-PCR和Western blot检测细胞内TSP-1、CD36、p38MAPK、VEGF、VEGFR-1、EGF和PDGF等基因和蛋白的表达情况.结果 CCK-8及细胞侵袭实验结果显示转染TSP-1过表达载体后细胞活力和侵袭能力相较于空载体组均有显著增强(P<0. 05),而转染TSP-1干扰载体后细胞活力和侵袭能力均有明显降低(P<0. 05);免疫荧光、qPCR、Western blot结果显示过表达TSP-1后TSP-1、EGF、P38、PDGF、VEGF、VEGFR-1的mRNA水平及蛋白表达均有明显升高(P<0. 05),而转染TSP-1干扰载体后相关基因和蛋白的表达均有显著降低(P<0. 05).结论 TSP-1基因能够促进MG-63细胞的增殖和侵袭能力,促进人骨肉瘤血管形成,其机制与生长因子EGF、VEGF、PDGF表达升高及P38-MAPK通路激活有关.