趋化因子CC配基2对 α-Synuclein诱导的小胶质细胞增殖及神经元凋亡的影响

目的 探讨趋化因子CC配基2(CCL2)对α-突触核蛋白(α-Synuclein)介导的小胶质细胞增殖及神经元凋亡的影响.方法 体外分离培养原代小胶质细胞和原代神经元.小胶质细胞分为4组,依次为对照组、CCL2组、α-Synuclein组、CCL2+α-Synuclein组.对照组中加入等量的PBS,CCL2组细胞中加入含有CCL2浓度为0.05 ng/μL的培养液.α-Synuclein组细胞中加入含有α-Synuclein浓度为0.2 ng/μL的培养液.CCL2+α-Synuclein组中加入含有0.05 ng/μL CCL2、0.2 ng/μLα-Synuclein的细胞培养液.培养24 h后,检测小胶质细胞增殖情况及细胞中α-Synuclein蛋白水平,同时检测细胞培养液中TNF-α、IL-1β、NO含量.用各组小胶质细胞培养液培养原代神经元,观察神经元凋亡情况及神经元中Cleaved Caspase-3、Akt、p-Akt水平.结果 CCL2组、α-Synuclein组、CCL2+α-Synuclein组小胶质细胞增殖活性及分泌TNF-α、IL-1β、NO水平明显高于对照组(P<0.05).CCL2组、CCL2+α-Synuclein组小胶质细胞中 α-Synuclein水平明显高于对照组(P<0.01).CCL2组、α-Synuclein组、CCL2+α-Synuclein组小胶质细胞培养液作用后的神经元凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白水平明显高于对照组,p-Akt水平低于对照组(P<0.01).结论 CCL2促进α-Synuclein引起的小胶质细胞增殖和分泌TNF-α、IL-1β、NO的能力,对α-Synuclein引起的神经元凋亡也具有促进作用,促凋亡作用机制可能与Akt信号通路有关.