携带肝细胞生长因子的腺病毒感染脐带间充质干细胞的实验研究

目的：通过检测感染携带肝细胞生长因子（HGF）腺病毒的脐带间充质干细胞（hUC‐MSC）内酪氨酸羟化酶（TH）、多巴胺转运体（DAT）和多巴胺（DA）的表达水平及动态变化，探讨hUC‐MSC在 HGF过表达的情况下是否能向多巴胺能神经元分化，为 HGF基因修饰hUC‐MSC治疗帕金森病提供细胞基础。方法采用组织块法分离培养hUC‐MSC ，流式细胞仪检测细胞是否表达间充质干细胞分子表面标志CD29、CD44和CD105；不同感染复数（0、50、100、150、200、400）的携带绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad‐GFP）感染hUC‐MSC后，流式细胞仪检测感染效率，并确定最佳感染复数；运用携带HGF的腺病毒感染hUC‐MSC后，细胞免疫酶化学方法检测TH和DAT的表达情况。结果采用组织块法可从脐带中成功分离出（表达间充质干细胞分子表面标志CD29、CD44和CD105）hUC‐MSC ；Ad‐GFP可高效感染hUC‐MSC ，随着感染复数的升高，感染效率可达99.99％；感染携带HGF的腺病毒（Ad‐HGF）后，hUC‐MSC可逐渐表达TH和DAT ，同时细胞形态也逐渐由纺锤状向多角形和不规则样转变。结论腺病毒可高效感染hUC‐MSC ；感染Ad‐HGF后，hUC‐MSC可逐渐向多巴胺能样神经元分化。