Fas相关死亡结构域蛋白基因沉默对帕金森病模型鼠黑质凋亡相关蛋白的影响

目的 探讨Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)基因沉默对帕金森病(PD)大鼠行为学变化及黑质死亡受体和半胱氨酸蛋白酶8(caspase-8)表达的影响.方法 应用化学修饰的干扰RNA及立体定向技术等,在制作PD模型前黑质内注入FADD siRNA、FADD siRNA阳性对照物或FADDsiRNA阴性对照物.观察正常对照组、PD组、FADD siRNA组、FADD siRNA阳性对照组和FADDsiRNA阴性对照组(每组各15只)大鼠阿朴吗啡诱导的旋转行为的改变；采用Western blot分析和RT-PCR等方法,检测以上5组大鼠黑质FADD、Fas和caspase-8蛋白及mRNA的半定量表达.结果 正常对照组大鼠阿朴吗啡诱导下无旋转行为,其余4组旋转次数超过6 r/min(持续30 min)的大鼠(只)分别为12(12/14)、3(3/13) 、4(4/15) 、11 (11/14),组间比较差异具有统计学意义(x2＝18.56,P=0.000)；与正常组比较,PD组各个蛋白及mRNA的表达均明显升高；与PD组比较,FADD siRNA组FADD和caspase-8蛋白及mRNA的表达受到明显抑制,差异具有统计学意义,但PD组和阴性对照组间及其余3组间比较差异均无统计学意义.与正常组比较,其余4组Fas蛋白及mRNA的表达均明显升高,差异具有统计学意义,但4组间比较差异无统计学意义.结论 死亡受体凋亡通路在PD发病机制中起重要作用,而FADDsiRNA能够有效抑制此通路,从而在一定程度上具有神经保护作用.