槲皮素对胆管癌的抑制作用及其机制研究

目的 考察槲皮素对胆管癌是否具有治疗作用,并探索其作用机制.方法 常规培养人胆管癌细胞RBE和HUCCT1,分别给予不同浓度槲皮素处理,利用MTT法检测其对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测不同浓度槲皮素处理后细胞凋亡情况;根据细胞划痕实验观察其对细胞迁移的影响;根据实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测细胞中炎症因子的表达水平;Western blot检测槲皮素处理后细胞中目的蛋白的表达情况.结果 MTT结果显示,槲皮素能够剂量依赖性的抑制细胞增殖,其中1 000 μM槲皮素处理24h后抑制作用最显著,RBE和HUCCT1细胞系抑制率分别为(53.14±0.74)％和(55.90±2.37)％;流式细胞仪检测结果表明,槲皮素显著促进细胞凋亡;细胞划痕结果提示,不同浓度槲皮素均可显著抑制细胞迁移;qRT-PCR结果揭示槲皮素能抑制RBE细胞中细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-a、MMP9及其上游P65在mRNA水平的表达(P＜0.01);Western blot结果表明不同浓度槲皮素可以抑制p-AKT、p-mTOR蛋白的表达.结论 槲皮素对胆管癌具有抑制作用,其可能通过抑制炎症因子的表达进而抑制AKT/mTOR信号通路最终抑制人胆管癌细胞的增殖、迁移,并促进胆管癌细胞凋亡.