布美他尼对 LPS 诱导的小胶质细胞活化及炎性分泌的影响

目的：观察钠-钾-氯共转运体(Na+-K+-2Cl- cotransporter 1,NKCC1)的特异性抑制剂布美他尼(Bumetanide)对 LPS(脂多糖)诱导的小胶质细胞活化及炎性因子分泌的影响。方法差速贴壁法培养大鼠原代小胶质细胞,纯化的小胶质细胞分为对照组,LPS 组(1.0μg/ml)和布美他尼干预组(NKCC1抑制剂,10μM),在干预1、3、6和12 h 固定细胞爬片,免疫荧光双标显示小胶质细胞活化形态；各时间点收取上层培养基,用 ELISA 法测定各组培养基中 TNF-α和 IL-1β的水平。结果LPS 干预后小胶质细胞活化,体积增大,布美他尼干预后小胶质细胞活化受到抑制。小胶质细胞分泌的 TNF-α和 IL-1β在 LPS 干预1 h 时开始明显增加,TNF-α的分泌在6 h 达到最高峰；IL-1β的分泌在3 h 时达到最高峰(P <0.05)。布美他尼干预后与LPS 组比较,TNF-α和 IL-1β分泌明显减少,其中在3、6、12 h 时 TNF-α分泌显著降低(P <0.05),而 IL-1β的分泌在1、3、6、12 h 时明显降低(P <0.05)。结论布美他尼可减少 LPS 诱导的小胶质细胞活化及炎性因子分泌增加,提示 NKCC1通路在小胶质细胞活化及炎性因子分泌中发挥了重要作用。