敲除let-7a减轻脑缺血再灌注后炎症反应和神经损伤

目的 研究微小RNA let-7a在脑缺血再灌注后神经损伤中的作用及机制.方法 将大鼠分为假手术组、对照组、anti-let-7a组和GFP组,每组各12只大鼠,假手术组大鼠为假手术组.对照组、anti-let-7a组和GFP组分别经尾静脉给予生理盐水、表达anti-let-7a的AAV-9质粒或者对照空质粒实验,然后通过线栓法建立脑缺血再灌注大鼠模型.模型建立24 h后,TTC法检测梗死体积,tunel法检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3表达,ELISA和qRT-PCR检测脑组织中TNF-α和IL-6 的表达.并通过Western blot、qRT-PCR和荧光报告基因验证let-7a对MKP1表达的调控.结果 anti-let-7a组大鼠脑梗死体积明显小于GFP组和对照组,脑组织内凋亡细胞数、caspase-3、TNF-α和IL-6 的表达明显低于GFP组和对照组.let-7a可与MKP1 mRNA 3''UTR端结合,下调MKP1在PC12细胞中的蛋白表达.结论 敲除let-7a可通过调控MKP1表达,抑制MAPK信号通路的激活从而减轻脑缺血再灌注后的炎症反应和细胞凋亡发挥神经保护作用.