二甲双胍对27-羟基胆固醇诱导的HT22细胞损伤的保护作用

目的:探究二甲双胍(Met)对27-羟基胆固醇(27-HC)诱导的HT22细胞损伤的保护作用.方法:将HT22细胞分为对照组(control)、27-HC处理组(27-HC)和27-HC联合Met处理组(27-HC+ Met).采用MTT法确定27-HC诱导HT22细胞损伤模型的最佳浓度及不同浓度的Met对细胞活性的影响,确定Met的最佳预保护浓度;利用Hoechst 33342染色观察细胞凋亡;利用商品化的试剂盒检测HT22细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;利用Western Blot法检测HT22细胞中NMDA受体亚单位2B(NR2B)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)蛋白表达及AMPK蛋白的磷酸化水平.结果:与对照组相比,27-HC诱导后的HT22细胞活性显著下降(P＜0.05),细胞形态异常且凋亡细胞增加,LDH活性升高,SOD活性降低,NR2B的表达和p-AMPK水平降低;Met预处理后,细胞活性提高,细胞形态趋于正常且凋亡细胞减少,LDH活性降低,SOD活性升高,NR2B的表达和p-AMPK水平增加.结论:Met通过AMPK/NR2B信号通路调节细胞氧化应激水平,发挥对27-HC诱导的HT22细胞损伤的保护作用.