一种获得小鼠背侧齿状回健康颗粒细胞的脑片制备方法

目的:研究获得背侧齿状回健康颗粒细胞的制片方法.方法:成年小鼠.(1)控制切片角度,尽量保留颗粒细胞顶树突的完整,沿水平20 ～ 30°切片角度获取海马横向(transverse)脑片;(2)注意区分脑片的正、反面,选择海马脑片反面的背侧齿状回上片;(3)合并使用其它保护脑片细胞活性的措施,如采用无钠切片液,切片液中添加抗氧化剂等.结果:本方法所得特定角度的海马横向脑片,其上有大量颗粒细胞表现出轮廓清晰、柔和、胞体圆润的健康状态,且记录出颗粒细胞兴奋性微小突触后电流(mEPSCs)的频率和幅度,均较传统海马横向脑片方法有明显增加.结论:适当的切片角度可保持颗粒细胞远端树突末梢的完整,提高细胞的活性,获得大量健康颗粒细胞.提示在制备脑片时要考虑感兴趣细胞整体的走行,保证切片时细胞整体的完整性.