人参皂甙Rd通过PI3K/AKT/mTOR/Hif-1α通路促进成年大鼠缺血性脑卒中后的血管发生

目的:探索人参皂甙Rd(Ginsenoside Rd,GSRd)对成年大鼠缺血性脑卒中血管发生的作用及可能机制.方法:80只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体重280 ～ 300 g,用线栓法建立局灶性短暂性大脑中动脉阻塞模型(focal transient middle cerebral artery occlusion,MCAO),Sham为手术但不阻塞.随机分为四组,每组20只:Sham+生理盐水(SA)、Sham+ GSRd、MCAO+ SA、MCAO+ GSRd.术后3d,通过RECA-1免疫荧光组织化学染色标记血管内皮细胞、并计算梗死灶周围微血管的密度和分支点.通过Western Blot检测梗死侧皮层血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),低氧诱导因子(hypoxia-inducibal factor 1 alpha,Hif-1α),磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR),磷酸化的蛋白激酶B(p-protein kinase B,p-AKT)的蛋白表达水平.结果:(1)免疫荧光组织化学染色结果显示:与MCAO+ SA对照组相比,MCAO+ GSRd治疗组的血管数(518.75±34.88/mm2 vs 391.40±17.66/mm2,P ＜0.001)和分支点(255.47±36.05 /mm2 vs 203.13±12.05/mm2,P＜0.01)显著增多.Sham+ SA和Sham+ GSRd的血管数(503.12 ±45.32/mm2vs 492.18 ±61.93/mm2)和分支点(270.31±35.94/mm2 vs 258.59 ±42.25/mm2)则无显著差异;(2) Western Blot结果显示:与对照组相比,GSRd显著增加VEGF,Hif-1 α,p-mTOR,p-AKT的蛋白表达水平(P＜0.05).(3)mTOR特异性阻断剂雷帕霉素抑制了GSRd对Hif-1 α(P ＜0.01)、VEGF(P＜0.05)的作用.结论:人参皂甙Rd可促进成年大鼠脑卒中后的血管发生,其对血管发生的作用可能是通过PI3 K/AKT/mTOR/Hif-1a通路所介导.