人尿激肽原酶通过抑制细胞凋亡保护小鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探讨人尿激肽原酶(human urinary kallidinogenase,HUK)对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 110只雄性ICR小鼠随机分为假手术组、对照组和HUK组,采用短暂性大脑中动脉闭塞法制作脑缺血再灌注模型.利用氯化三苯四氮唑染色检测梗死体积,蛋白质印迹法检测缺血皮质Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶-3蛋白表达量,免疫组化染色检测缺血侧海马CA1区Bcl-2和Bax阳性细胞,TUNEL染色法检测缺血皮质细胞凋亡.结果 假手术组未见梗死灶和神经功能缺损.缺血再灌注24 h时,HUK组梗死体积(P＜0.01)和神经功能缺损评分(P=0.02)均显著低于对照组;缺血再灌注72 h时,HUK组梗死体积(P＜0.01)和神经功能缺损评分(P=0.03)同样显著低于对照组.蛋白质印迹分析显示,HUK组缺血皮质Bcl-2表达显著高于对照组(P ＜0.001),而胱天蛋白酶-3(P＜0.001)和Bax(P ＜0.001)表达均显著低于对照组.假手术组小鼠未见凋亡细胞,HUK组缺血侧海马CA1区凋亡细胞数量(P＜0.01)和Bax阳性细胞数量(P＜0.01)显著少于对照组,而Bcl-2阳性细胞数量显著多于对照组(P＜0.01).结论 HUK对小鼠缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达以及下调胱天蛋白酶-3和Bax蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关.