茶多酚对长波紫外线诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用

目的 探讨茶多酚对长波紫外线(UVA)诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用及其机制.方法 用光学显微镜、MTF法检测UVA对细胞形态及增殖活性影响,构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;用MTT法检测茶多酚对细胞增殖活性影响,获得茶多酚对HaCaT细胞最适浓度;检测茶多酚处理前后细胞增殖活性(MTT法)、细胞膜损伤(LDH)情况;Western blot、RT-PCR检测荼多酚处理前后核因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor2,Nrf2)蛋白胞内分布、Nrf2 mRNA及下游Ⅱ相解毒酶表达情况.结果 20 J/cm2 UVA致HaCaT细胞形态学改变且抑制细胞增殖活性(0.11±0.50;P＜0.05),可用于构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;茶多酚剂量依赖性抑制细胞增殖活性,11 μg/mL为本实验最适茶多酚浓度;相比对照组、UVA组的细胞增殖活性(1.043±0.203;0.113±0.050)和LDH(1.000±0.092;1.858±0.016),照射前加入茶多酚可显著提高细胞增殖活性(1.322±0.080;均P＜0.05)和减少LDH释放(0.500±0.079;均P＜0.05);Western blot、RT-PCR结果显示,茶多酚可显著增加核内Nrf2蛋白表达,上调Nrf2 mRNA(1.804±0.229)及下游Ⅱ相解毒酶SOD mRNA(1.172±0.148)、CAT mRNA(1.617±0.259)、GCLCmRNA(1.183±0.083)、GCLM mRNA(1.228±0.256)的表达.结论 茶多酚可有效防护UVA诱导HaCaT细胞急性光损伤,且茶多酚可增加核内Nff2蛋白及其mRNA和下游Ⅱ相解毒酶mRNA的表达,茶多酚的光防护作用可能与Nrf2信号通路有关.