盐酸左西替利嗪对人毛乳头细胞生长影响的初步研究

目的 初步探讨不同浓度盐酸左西替利嗪对体外培养人毛乳头细胞(hDPC)生长的影响及机制.方法 将hDPC在含1、10、100、1 000、10 000 μg/L盐酸左西替利嗪的DMEM培养液中培养48 h,免疫荧光染色观察细胞的生长情况,MTT法检测细胞增殖活力,实时荧光定量PCR法检测环氧化酶2(COX-2)、前列腺素D2合酶(PTGDS)、前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)、G蛋白偶联受体44(GPR44)、蛋白激酶B(AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的mRNA表达水平;Western印迹法检测PTGDS蛋白水平.hDPC在含以上浓度盐酸左西替利嗪的DMEM培养液中培养24 h,酶联免疫吸附试验检测培养上清液中前列腺素D2(PGD2)和PGD2受体(PGD2R)的水平.以不加药物同等条件培养的hDPC为对照组.采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析,组间两两比较使用LSD-t检验.结果 免疫荧光染色显示,100 μg/L组细胞生长良好,融合度超过90％.MTT法显示,不同浓度盐酸左西替利嗪组与对照组hDPC的增殖率差异有统计学意义(F=42.22,P＜0.05),100 μg/L组增殖率(115.80％±5.10％)高于对照组(100％,t=28.26,P＜0.05).不同浓度盐酸左西替利嗪组的COX-2、PGF2a、PTGDS、GPR44、AKTmRNA相对表达水平(以对照组表达为1)差异均有统计学意义(F值分别为1.97、3.66、2.17、2.66、7.32,P＜0.05),PGE2、GSK3β表达差异无统计学意义(F值分别为0.87、1.19,P＞0.05);100 μg/L组COX-2、PTGDS、GPR44 mRNA表达(0.84±0.08、0.81±0.10、0.85±0.09)低于对照组(t值分别为1.97、2.17、2.66,均P＜0.05),PGF2α、AKT的表达(1.96±0.25、1.74±0.32)高于对照组(t值分别为3.66、7.32,均P＜0.05).不同浓度盐酸左西替利嗪组PTGDS、PGD2、PGD2R水平差异均有统计学意义(P＜0.05),100 μg/L组PTGDS、PGD2、PGD2R蛋白水平均低于对照组(P＜o.05).结论 盐酸左西替利嗪可能通过抑制PGD2-GPR44通路,激活AKT信号通路,促进体外培养人毛乳头细胞的生长.