抑制消减杂交技术筛选骨髓间充质干细胞与视网膜神经节样细胞差异表达基因

Recent Advances in Ophthalmology(2020)

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Abstract
目的 抑制消减杂交技术筛选和克隆视网膜神经节(RGC)样细胞与骨髓间充质干细胞的差异表达基因.方法 提取RGC样细胞总RNA为检测子,骨髓间充质干细胞的总RN A为驱动子,进而用抑制消减杂交技术方法获得消减杂交产物.结果 本消减文库共挑取克隆120个,经聚合酶链式反应(PCR)鉴定,其中含有插入片段的阳性克隆有20个.在这些阳性克隆中,PCR扩增片段大小分布于250~1500 bp.共得到5个差异基因片段,这些差异表达基因与视觉信号转导、神经细胞再生等功能有关.结论 抑制消减杂交技术有效地克隆了骨髓间充质干细胞诱导前后差异表达的基因.
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