高氧对小鼠视网膜新生血管模型中根蛋白的影响

目的 探讨高氧诱导C57BL/6J小鼠视网膜新生血管形成过程中根蛋白(Radixin)的表达变化,为进一步研究视网膜新生血管性疾病的防治方法提供理论基础.方法 将72只健康7d龄小鼠随机分为2组,分别为:高氧诱导组:小鼠置于含氧体积分数为75％±2％的氧箱内饲养5d构建高氧诱导视网膜新生血管动物模型;正常对照组:小鼠置于正常氧环境中饲养.待生后12d、13d、17 d、21 d、30 d分别处死小鼠.应异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FD-2000S)血管灌注造影视网膜铺片和HE染色观察视网膜新生血管的形态变化;应用免疫组织化学染色检测视网膜中Radixin的表达定位;应用RT-PCR和Westernblot检测不同时间点视网膜Radixin mRNA和蛋白表达情况.结果 免疫组织化学染色结果显示两组Radixin均有表达,但高氧诱导组小鼠视网膜新生血管管壁、血管芽、内皮细胞和神经节细胞层Radixin大量表达.Real-time-PCR及Western-blot结果显示,不同组别和不同时间点间Radixin mRNA和蛋白表达水平差异均有统计学意义(mRNA:Fgroup=59.273,P=0.000,Ftime=538.071,P=0.000,Finteraction=297.126,P=0.000;蛋白:Fgrop=419.307,P=0.000,Ftime=663.946,P=0.000,Finteraction=354.538,P=0.000).高氧诱导组小鼠生后12d、生后13 d Radixin mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组同龄小鼠低,差异均有统计学意义(均为P＜0.01),生后17 d、生后21 d Radixin mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组同龄小鼠明显增高,差异均有统计学意义(均为P =0.000).正常对照组Radixin mRNA和蛋白的表达总体稳定在较低水平.两组生后30 d时RadixinmRNA和蛋白表达水平差异均无统计学意义(P=0.058、0.082).伴随着视网膜新生血管的增生和消退,Radixin mRNA和蛋白的表达水平均呈先升高后降低的趋势.结论 Radixin参与了视网膜新生血管的形成,可能会成为预防和治疗视网膜新生血管性疾病的新靶点.