牙本质细胞外基质蛋白对乳牙牙髓干细胞体外增殖、分化能力的影响

目的:提取牙本质细胞外基质蛋白(Dentin extracellular matrix proteins,DEMPs)研究其对人脱落的乳牙牙髓干细胞(Stem cell from human exfoliated deciduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响.方法:采用组织块联合酶消化法获得SHED并进行体外培养.成骨诱导液诱导细胞,鉴定其多向分化能力;拔取健康牛牙,用4mol/L盐酸胍和0.5 mol/L EDTA提取DEMPs,四唑盐比色法(MTT)检测不同浓度DEMPs对SHED增殖能力的影响,同时测定DEMPs对SHED碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测牙本质磷蛋白与牙本质基质蛋白1的mRNA表达情况.结果:DEMPs诱导细胞培养3d、5d可促进细胞增殖.细胞培养5、7d上调ALP活性,RT-PCR结果显示,DEMPs诱导后可促进DSPP与DMP-1基因的表达.结论:牙本质细胞外基质蛋白可以促进SHED的增殖与牙向分化能力.