持续牵张促进小鼠骨髓间充质干细胞成骨向分化机制的研究

目的:研究p38MAPK在持续性机械牵张力促进C57BL/6J小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用机制.方法:C57BL/6J小鼠BMSCs被随机分为对照组和牵张力阻断组.牵张力阻断组预先用p38MAPK特异性阻断剂SB203580处理1h,后用Flexercell加力仪加载0.5Hz,0.8％的牵张力.对照组不做特殊处理.分别对两组细胞施加0、30 min和60 min的牵张力.采用Western blot检测P-p38MAPK蛋白的表达情况,Real time-PCR检测成骨基因ALP、COL I、OCN mRNA的表达变化.结果:C57BL/6J小鼠BMSCs传代后细胞生长状态稳定,呈梭形,具有多向分化潜能.Real time-PCR结果显示对照组BMSCs中ALP、COL I、OCN mRNA表达在不同时间点(30 min与0 min,60 min与30 min)间差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组ALP、COLI、OCN的表达量均明显高于同一时间点(30 min和60 min)牵张力阻断组(P＜0.05).Western blot结果显示,对照组内BMSCs中P-p38MAPK的蛋白水平在不同时间点间(30 min与0 min,60 min与30 min)差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组P-p38MAPK蛋白的表达量均明显高于同一时间点(30 min和60 min)牵张力阻断组(P＜0.05).结论:所采用的0.5 Hz,0.8％的机械牵张力在持续牵张力下可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化.