特定序列寡核苷酸对人骨髓间充质干细胞增殖能力的影响

目的:比较不同种类特定序列寡核苷酸(Oligonucleotide,ODN)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)增殖能力的影响.方法:密度梯度离心法分离培养hBMSCs,传至第3代进行成骨、成脂及成软骨诱导,鉴定其多向分化能力;将hBMSCs以不同密度接种(3.0×103/cm2、6.0×103/cm2、1.2×104/cm2、2.4×104/cm2),采用CCK-8连续检测7d,确立最佳铺板密度;依据ODN种类(MT01、FC003、Sa05D和终浓度(0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、4.0mg/L)分为12个实验组和1个对照组(加等量PBS),采用CCK-8连续检测3d,明确不同种类及浓度的ODN对hBMSCs增殖能力的影响.结果:分离培养的hBMSCs具有成骨、成脂和成软骨的多向分化能力;以6.0×103/cm2的接种密度铺板可获得良好的细胞生长曲线;hBMSCs在加入每种不同浓度的ODN后,与对照组相比,终浓度为0.5 mg/L的ODN FC003在第1天检测到光密度值显著升高(P＜0.01);终浓度为1.0 mg/L和4.0 mg/L的ODNSa05f在第1天检测到光密度值均显著降低(分别为P＜0.01,P＜0.05);终浓度为2.0 mg/L的ODN MT01在连续3d内的光密度值均明显升高,差异具有统计学意义(第1天P＜0.01,第2,3天P＜0.05).结论:终浓度为2.0 mg/L的ODN MT01可显著促进hBMSCs的增殖.