地西他滨调控舌癌细胞RUNX3基因甲基化

目的:探讨经典甲基化酶抑制剂地西他滨(5-氮杂-2'-脱氧胞苷5-aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对舌鳞状细胞癌细胞系SCC-4中抑癌基因RUNX3基因甲基化水平的影响.方法:用不同浓度的地西他滨处理舌癌细胞株SCC-4,72 h后甲基化特异性PCR(MSP)检测SCC-4细胞RUNX3基因的甲基化状态,实时定量qPCR技术检测SCC-4细胞RUNX3基因mRNA的表达,Western blot检测RUNX3、p53及裂解PARP蛋白的表达.结果:MSP检测未处理组细胞RUNX3基因呈高甲基化状态,经地西他滨处理后甲基化得到逆转;qPCR检测显示不同浓度地西他滨处理SCC-4细胞72 h后相对mRNA表达随着药物浓度增加而增加(P＜0.05);Western blot分析结果显示不同浓度的地西他滨组的RUNX3蛋白表达相对水平随药物浓度增加而增加,并且增加p53及裂解PARP蛋白水平.结论:地西他滨可逆转舌癌SCC-4细胞中RUNX3基因的高甲基化状态,并恢复RUNX3基因mRNA及蛋白的表达,促进细胞凋亡.