miR-21对唾液腺腺样囊性癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的:探讨miR-21对人唾液腺腺样囊性癌细胞株(SACC-LM)增殖、凋亡的影响及其相关作用机制.方法:将SACC-LM细胞分为3组,采用LipofectamineTM2000做瞬时转染.干扰组转染miR-21 inhibitor,阴性对照组转染无关核苷酸序列,空白对照组不转染.采用实时荧光定量PCR检测转染后细胞中miR-21和PDCD4、Bcl-2 mRNA的表达水平.以CCK8法检测转染24、48、72、96 h后细胞的增殖活性,Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western免疫印迹检测转染后靶蛋白PDCD4、Bcl-2的表达量.采用SPSS 16.0软件包对所得数据进行统计学分析.结果:转染miR-21 inhibitor的细胞中miR-21、Bcl-2表达下调(P＜0.01),而PDCD4基因表达上调(P＜0.05).CCK8检测结果表明,miR-21表达下调可以明显抑制SACC-LM细胞的增殖活性,并呈时间依赖性(P＜0.05).流式细胞术检测结果表明,干扰组细胞凋亡率显著高于阴性对照组和空白组(P＜0.05);Western免疫印迹结果显示,PDCD4蛋白的表达较对照组显著升高(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:下调miR-21的表达可抑制SACC-LM细胞的增殖活性,诱导细胞凋亡,其机制可能与细胞内PDCD4表达上调,Bcl-2表达下调有关.