miR-98-5p与靶基因HMGA2相关调控机制抑制喉鳞癌的作用及临床意义

目的 研究miR-98-5p通过靶向调控HMGA2在喉鳞癌中的相关作用及临床意义.方法 采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中miR-98-5p的表达水平;检测转移的肿瘤组织和无转移的肿瘤组织间miR-98-5p的表达水平;分析miR-98-5p的表达与患者临床特征的相关性.microRNA靶基因数据库进行筛选,预测HMGA2为miR-98-5p的潜在靶基因:荧光素酶报告基因法进行验证;qRT-PCR和Western印迹检测miR-98-5pmimics对HMGA2的mRNA及蛋白表达的影响;qRT-PCR检测喉鳞癌组织中HMGA2的mRNA表达水平;用CCK8实验检测miR-NC对照组,miR-98-5pmimics转染组和miR-98-5pmimics+HMGA2转染组的吸光度(OD)值;使用流式细胞法检测miR-98-5pmimics转染组和miR-98-5p mimics+HMGA2转染组S期细胞的比值.在裸鼠右肩胛近腋窝处皮下接种喉鳞癌Hep-2细胞培养液,检测裸鼠肿瘤体积及重量;检测miR-98-5p在miR-98-5pmimics转染组裸鼠肿瘤组织中的表达水平.结果 对比癌旁正常组织,喉鳞癌组织中miR-98-5p的表达水平明显降低;转移的肿瘤组织中miR-98-5p的表达水平明显低于无转移的肿瘤组织;miR-98-5p的表达随着分化程度及临床分期的升高呈下降趋势;无淋巴结转移患者miR-98-5p的表达水平明显高于有淋巴结转移患者.miR-98-5p可以通过结合HMGA2的3'-UTR,进而抑制HMGA2的表达;miR-98-5pmimics转染组中HMGA2蛋白表达量相比对照组明显降低;miR-98-5p能够抑制HMGA2的mRNA翻译及其蛋白表达;qRT-PCR检测结果也显示喉鳞癌组织相比癌旁正常组织,HMGA2的mRNA表达量明显升高;miR-98-5pmimics转染组的OD值明显低于对照组,而miR-98-5pmimics+HMGA2转染组的OD值明显高于miR-98-5pmimics转染组;miR-98-5pmimics转染组S期细胞比值明显低于对照组,而miR-98-5pmimics+HMGA2转染组S期细胞比值明显高于miR-98-5pmimics转染组;miR-98-5p可抑制喉鳞癌细胞Hep-2的增殖和细胞周期在S期聚集,而这些抑制效果可被HMGA2补回;miR-98-5p过表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,抑制肿瘤的生长.结论 miR-98-5p能抑制HMGA2而抑制喉鳞癌的进程,可能成为喉鳞癌诊断及治疗的一个新靶点.