根管充填失败后根管内微生物的分子生物学分析

目的：基于16S rRNA，构建治疗失败根管内微生物的16S rRNA基因文库，并通过分子生物学方法分析其微生物的多样性。方法：选取经完善根管治疗2年后失败的患牙20例，根管内取样提取细菌DNA；然后用PCR扩增细菌16S rRNA基因，并构建其基因文库；最后通过测序比对构建系统发育树以确定微生物种类。结果：PCR检测显示，所有样本中有细菌出现；20个样本中共发现15种不同的系统发育型细菌（phlylotype），分属4个细菌门（phylum）：厚壁菌门（Firmicutes）、变异菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacte-roidetes）、放线菌门（Actinobacteria）；每个样本中检出1～6种不同的细菌系统发育型，平均每个样本中可检测到2．7种；在检出的15种细菌中，以粪肠球菌（Enterococcus faecali）的出现频次最高（60％，12／20），微小消化链球菌（Peptostreptoccus micros）次之（40％，8／20），而另外13种细菌的出现频次较低，其中有4种系统发育型细菌（Rummeliibacillus、Exiguobacterium aurantiacum、Pseudomonas veronii、phocaeicola abscessus ）只出现了1次。结论：根管治疗失败主要是由多种细菌感染所致，其中以粪肠球菌的检出率最高。