重组腺病毒p53基因诱导舌癌细胞株SCC-15凋亡的研究

目的 检测重组腺病毒介导的p53基因(Ad-p53)对舌癌细胞株SCC-15的转染率及增殖抑制作用,分析Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制.方法 通过构建带有示踪基因-红色荧光蛋白基因(DsRed)的Ad-p53,荧光显微镜、激光共聚焦显微镜下观察Ad-p53对舌癌细胞株SCC-15的转染情况及增殖抑制作用,应用流式细胞仪检测药物转染率及诱导凋亡率;Western blotting、RT-PCR、Q-PCR检测p53及其上下游基因MDM2、P21基因以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达变化,探讨Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制.结果 随着Ad-p53-DsRed感染复数(MOI)的增加,转染率、细胞凋亡率逐渐增加.Western blot和RT-PCR/QPCR检测到Ad-p53-DsRed作用后P53、P21、促凋亡基因Bax的mRNA和蛋白表达增加,而抗凋亡基因Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低.结论 Ad-p53能有效转染并诱导舌癌细胞株SCC-15细胞凋亡.