哈维弧菌抗体的制备及其在磁性免疫层析试纸条的应用
Military Medical Sciences（2018）
Abstract
目的 建立快速检测哈维弧菌的免疫学方法.方法 以甲醛灭活的哈维弧菌菌体为免疫抗原,对新西兰大白兔进行免疫得到哈维弧菌多克隆抗体;将多克隆抗体用间接ELISA法对创伤弧菌、副溶血性弧菌等进行特异性检测;将哈维弧菌多克隆抗体与磁珠结合,并将多克隆抗体标记在磁珠上形成特异性磁纳米探针,再分别以哈维弧菌多克隆抗体和山羊抗兔IgG作为检测线T线和质控线C线,初步实现了双抗体夹心模式的磁性免疫层析试纸条,并对磁珠偶联抗体添加量进行优化.结果 经ELISA法检测,哈维弧菌多克隆抗体效价为1:80000;其特异性良好,即此多克隆抗体与不同致病类型的食源性致病菌无交叉反应;最佳偶联抗体添加量为140μg;半定量检测时间为10 min,检测的准确性和灵敏度已达到最优,通过单纯的肉眼观察,可实现5×104 CFU/ml哈维弧菌的检测.结论 成功制备高效价哈维弧菌多克隆抗体并与纳米磁性材料进行了结合,为深入研究哈维弧菌的免疫原性与免疫学快速检测方法提供了基础.
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