Ad－HGF基因修饰的胎盘间充质干细胞治疗兔肢体缺血的实验研究

目的：研究重组腺病毒介导肝细胞生长因子（ adenoviral vector mediated human hepatocyte growth factor，Ad－HGF）修饰的胎盘源间充质干细胞（ placenta－derived mesenchymal stem cells，PMSC）在兔肢体缺血模型中促新生血管生成的作用。方法无菌取足月产妇胎盘胎儿面中心区域胎盘组织，胶原酶消化法分离干细胞，体外培养传代，感染Ad－HGF 48 h后收集细胞用于治疗兔肢体缺血实验。左侧治疗组后肢缺血肌肉组织内多点注射总细胞数5×106／ml Ad－HGF修饰的PMSC，右侧对照组后肢缺血肌肉组织内注射生理盐水。结果治疗后第14天腹主动脉穿刺行数字减影血管造影（ digital subtraction angiography，DSA）检查，可见左侧肢体缺血治疗后微血管生成数明显多于未治疗右侧肢体，血管形成能力明显增强。苏木精伊红染色法（ HE）后置光镜下观察显示，治疗组毛细血管密度明显大于未治疗组（P＜0．05）。实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction，qPCR）检测后肢肌肉组织中血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor， VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（ basic fibroblast growth factor，bFGF）、HGF的表达明显升高（P＜0．05）。结论经Ad－HGF基因修饰的PMSC能明显促进血管新生，加快局部缺血组织血流循环的重建，是治疗肢体慢性缺血的有效手段。