红细胞分化相关基因敲除小鼠对低剂量辐射损伤敏感性的研究

目的：构建红细胞分化相关基因（ EDAG）敲除小鼠并研究其对低剂量辐射损伤的敏感性。方法利用锌指核酸酶技术（ ZFNs）建立EDAG敲除小鼠模型；通过外周血细胞计数、骨髓细胞的DNA损伤和集落形成能力评价低剂量辐射损伤。对野生型及EDAG敲除小鼠进行剂量率为0．31 Gy／min的X线照射，1 min／d，连续照射7 d，小鼠累计照射剂量为2．17 Gy。在X线照射后第1、3、5、7天称重并进行血常规检测（n＝7）；照射后第3天分离小鼠骨髓细胞，利用免疫荧光实验检测DNA损伤标志物p-H2A．x的表达水平（ n＝3）；照射后第5天分离小鼠骨髓细胞，接种集落并于7 d后进行集落计数（ n＝3）。结果成功建立了EDAG敲除小鼠模型并在蛋白水平进行了敲除效果的鉴定；X线照射后第3天，与野生型相比，EDAG敲除小鼠白细胞明显减少，敲除小鼠骨髓细胞DNA损伤标志物p-H2A．x表达水平增加；X线照射7 d后骨髓细胞的集落形成能力降低。结论研究发现EDAG敲除小鼠对低剂量辐射诱导的损伤更加敏感，表现为血细胞数量减少，骨髓细胞成集落能力下降，DNA损伤增加。表明EDAG敲除小鼠作为一种对辐射高度敏感的动物模型，可作为低剂量辐射损伤生物学效应评价的有力工具。